E0771：同基因乳腺癌模型

在本篇《聚焦》文章中，我们介绍了使用E0771模型进行的初始生长和功效研究的数据。此处提供的数据概述了E0771细胞系对免疫肿瘤学药物和放射疗法的反应，可支持设计出合理的组合研究。

三阴性乳腺癌（TNBC）是一种复杂的侵袭性乳腺癌亚型，由于缺少雌激素受体、孕激素受体和HER2扩增，因此难以进行靶向治疗。因此，业界一直在为TNBC寻找更好的治疗方案。为了满足对TNBC模型的需求，我们上个月重点介绍了EMT6模型，在本文中，我们介绍了另一种用于临床前免疫肿瘤学的TNBC同系模型E0771模型。 E0771细胞系是来自C57BL/6小鼠的自发性延髓性乳腺腺癌。[1] 亲代细胞系E0771与4T1[2]相比转移性很差，并且在Trp53 和KRAS基因上存在纯合突变。[3]

在本篇《聚焦》文章中，我们介绍了使用E0771模型进行的初始生长和功效研究的数据。此处提供的数据概述了E0771细胞系对免疫肿瘤学药物和放射疗法的反应，可支持设计出合理的组合研究。

E0771模型的肿瘤生长动力学如图1所示。倍增时间中值为约5-6天，肿瘤体积稳定增加，而没有明显的与肿瘤相关的体重减轻。这种生长速度带来三周的治疗窗口以评估抗肿瘤反应。未经治疗的肿瘤和同种型对照（大鼠IgG2b）治疗的肿瘤的生长参数相似（图1）。

图1：皮下E0771肿瘤的生长动力学。该图展示了空白对照与同型对照的比较。

肿瘤浸润免疫细胞的组成

基线肿瘤免疫成分使用流式细胞术进行了分析，并显示于图2中。E0771的免疫特征根据体积约750mm3的肿瘤确定。 肿瘤具有较高的CD45+细胞（70%）浸润率，其中T细胞群（CD8+ T细胞和CD4+ T辅助细胞）数量较多（各占6%）。Treg细胞群始终少于CD4+ T辅助细胞群或CD8+ T细胞群。在髓样细胞群中，E0771肿瘤在我们表征的乳腺癌细胞系中独一无二，因为它具有大量的M-MDSC，而G-MDSC几乎不存在。在所分析的肿瘤中，M1巨噬细胞始终少于M2巨噬细胞。这种组成表明存在免疫抑制性微环境。

图2：E0771的肿瘤免疫特征显示免疫细胞浸润。

对治疗的反应

在接受检查点阻断抗体（抗mPD-1、抗mPD-L1、抗mCTLA-4和抗mLAG3）、共刺激抗体（抗mGITR、抗mOX40和mCD137）和局部放射治疗的E0771荷瘤小鼠中评估了对免疫调节剂的反应。我们测试了对检查点抑制剂和共刺激抗体的抗肿瘤反应，其中在明显的肿瘤形成之前已开始给药（图3）。抗mPD-1治疗可完全消除肿瘤，而抗mPD-L1和抗mLAG3则产生了显著反应，分别取得12.7天和7.6天的肿瘤生长延迟（图3A）。同样，使用共刺激抗体抗mGITR、抗mCD137和抗mOX40进行治疗可引起实质性反应，无肿瘤幸存者（TFS）超过50%，TGD >27天（图3B）。

虽然这些结果清楚地表明了E0771对免疫疗法的反应性（图5），但其同时也强调了治疗开始时的肿瘤体积和治疗方案等因素对结果的重要性。免疫抑制性微环境有助于解释为什么大多数接受测试的免疫疗法产生的反应有限。局部光束放射可成为用于修饰免疫抑制微环境的有用治疗方式。因此，对局部放射剂量5、10和20Gy进行了测试，并发现它们的耐受性良好，TGD分别为5.1、6.0和10.6天（图6）。根据基线放射剂量反应数据，建议将10Gy局部放射用于联合治疗。

图6：对局部放射治疗的反应。

E0771 - 一个强大的临床前免疫肿瘤学乳腺癌模型

TNBC通常对免疫治疗的单一疗法具有抗性，由于其肿瘤CD8+ T细胞浸润极少，并且因突变负荷低而免疫原性低，因此被认为是免疫学上的“冷性”癌症。鉴于适度有利的免疫细胞浸润和对免疫治疗的反应，E0771同基因乳腺癌模型具有作为临床前免疫肿瘤学模型的巨大潜力。我们的数据概述了每种单一疗法的效果，并为联合治疗策略的设计提供了依据。治疗的开始时间和肿瘤的体积在决定结果的动态方面起着至关重要的作用，在使用E0771模型的研究设计中应予以充分考虑。

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参考资料

^[2]Johnston CN、Smith YE、Cao Y等人，(2015)。E0771.LMB肿瘤的功能和分子表征，前者是一种新的C57BL/6小鼠衍生的自发转移性乳腺癌模型。《Dis. Model Mech》，3月；8(3):237-51。