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Date: April 2018
多重免疫组织化学（IHC）是一种利用单一抗原染色的基本概念同时检测多个标记物的检测方法。它可实现对过氧化物酶、碱性磷酸酶和其他偶联的一抗或二抗的标记，并可使用多种常见方法来实现，包括间接或直接染色方案。
多重免疫组织化学（IHC）是一种利用单一抗原染色的基本概念同时检测多个标记物的检测方法。它可实现对过氧化物酶、碱性磷酸酶和其他偶联的一抗或二抗的标记，并可使用多种常见方法来实现，包括间接或直接染色方案
由于同时使用多种抗体具有诸多优势，研究人员一直将注意力集中在多重IHC上。它使我们可以一次收集更多数据，同时节省宝贵的组织样本。可以获取一个蛋白质靶标相对于另一个蛋白质靶标，以及与附近的组织结构或细胞器成比例的空间数据。它通常用于确定肿瘤中免疫肿瘤学标记物的子集，从而让我们深入了解肿瘤环境中发生的情况。多重IHC也已成为确定细胞中标记物共表达的重要解决方案。
图1：CT26肿瘤中的CD3（粉色）、CD4（绿色）和DAPI（蓝色）染色。
多重IHC可以使用多种方案完成，其中许多方案遵循与单抗体染色方法相同的概念。其中一种方法可以包括间接IHC的不同变体。根据测定法的设计，可以使用相同或不同的宿主抗体以及与荧光团偶联的第二抗体来完成间接多重IHC。辣根过氧化物酶（HRP）或碱性磷酸酶（AP）偶联的二抗也可用于检测具有不同色原的多种标记物。由于多种第二抗体可以与一种第一抗体结合，因此信号被放大，从而使低表达蛋白更加容易被发现。
多重IHC可以使用多种方案完成，其中许多方案遵循与单抗体染色方法相同的概念。其中一种方法可以包括间接IHC的不同变体。根据测定法的设计，可以使用相同或不同的宿主抗体以及与荧光团偶联的第二抗体来完成间接多重IHC。辣根过氧化物酶（HRP）或碱性磷酸酶（AP）偶联的二抗也可用于检测具有不同色原的多种标记物。由于多种第二抗体可以与一种第一抗体结合，因此信号被放大，从而使低表达蛋白更加容易被发现。
图2：CT26肿瘤中的CD3（粉色）、CD4（绿色）、CD45（红色）和DAPI（蓝色）染色。
Labcorp is now offering up to four-color multiplexing with conjugated antibodies and is continuously striving to validate new multiplexing options such as chromogen detection.我们已研发出在Bond RXm自动染色仪上实现一致染色的优化方案以及在Aperio VERSA扫描仪上获得数据高分辨率图像的优化方案。
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