靶向B细胞恶性肿瘤？Raji-Luc是测试CD19导向CAR-T细胞和其他新型方法的模型

Autor: 科学研发副总裁Maryland Franklin博士
Date: June 2017

尽管CD19对人类B细胞癌的直接影响仍在研究中，但其表达在大多数B细胞恶性肿瘤中均有发现。例如，急性淋巴细胞白血病（ALL）、B细胞淋巴瘤和B细胞白血病分别表现出80%、88%和100%的CD19表达。1 ALL伴随骨髓中淋巴母细胞的过度产生，其不断繁殖导致正常造血细胞生成的抑制。

ALL在幼儿中更常见，但也会出现在老年人中。儿童的治愈率>80%，而成年人的治愈率仅为20-30%。慢性淋巴细胞性白血病（CLL）是一种类似的疾病，确诊患病的通常为老年人。ALL和CLL都已被确定为适合采用CD19定向疗法的恶性肿瘤。虽然针对临床研发研究了抗CD19单克隆抗体和其他方法，但迄今为止，针对CD19相关恶性肿瘤最常见的治疗方法是嵌合抗原受体（CAR）修饰的T细胞（CAR-T）。CD19是用于该T细胞治疗策略的第一个靶标，而且仍然是活跃的临床研究领域。

在临床前，人类伯基特氏淋巴瘤细胞系Raji一直是确定与B细胞恶性肿瘤相关治疗方法的抗肿瘤活性的中流砥柱。 At Labcorp, we employ a luciferase-expressing Raji cell line (Raji-Luc) to allow us to track disease progression and therapeutic response over time through in vivo optical imaging.Raji-Luc是评估CD19导向的CAR-T治疗方法的绝佳模型。我们已在SCID和NSG小鼠中利用此模型进行了十几项CAR-T或其他细胞疗法研究。许多情况下，免疫缺陷性最强的小鼠品系NSG是细胞疗法生存率和留持性所必需的。因此，我们通过体内生物发光成像（BLI）（图1A和B）验证了NSG小鼠中Raji-Luc的生长，并发现了疾病的迅速播散，这通过大约20天的总生存期（发病率/死亡率，图1C）终点得到证明。与疾病的快速诱导一致，小鼠表现出进行性体重减轻（图1D），并最终出现后肢瘫痪，需要接受安乐死。

NSG小鼠中的Raji-Luc生长验证

抗CD20单克隆抗体——利妥昔单抗的抗肿瘤活性

与CD19类似，CD20也是B细胞的标志物，并且是针对非霍奇金淋巴瘤等B细胞恶性肿瘤的药物的初始靶标。抗CD20单克隆抗体利妥昔单抗的临床研发证明了将单克隆抗体用作肿瘤治疗药物的突破性意义。在SCID小鼠中，我们已经测试了利妥昔单抗的抗肿瘤活性，并证明了整体生存率的提高（图2A）与根据体内BLI确定的全身肿瘤负荷减轻相关（图2B和2C）。与NSG小鼠的研究相似，我们观察到了疾病进展的临床迹象，例如后肢麻痹和体重减轻（图2D）。除了体内BLI外，我们还使用离体BLI研究了各种组织中的疾病发生率（表1）。通过离体分析，我们进一步证明了利妥昔单抗治疗降低了总体疾病负担。